Tolüen solutulan sıçanların karaciğerinde ghrelin ekspresyonu

Abstract

Tolüen endüstride çok sık kullanılan, bağımlılık yapıcı ve toksik etkileri olan aromatik bir hidrokarbondur. Ghrelin ise yakın zamanda keşfedilen birçok doku gibi karaciğer dokusunda da bulunan çok fonksiyonlu bir hormondur. Bu çalışmada, karaciğer üzerine toksik etkileri olduğu bilinen tolüenin deneysel olarak sıçanlara uygulanması sonucunda karaciğer dokusunda ghrelin ekspresyonunun immünohistokimyasal yöntemlerle araştırılması amaçlanmıştır. Bu amaçla, 14 adet Wistar-Albino cinsi erkek sıçan iki eşit gruba ayrıldı. Grup I'deki sıçanlar kontrol olarak düzenlendi. Grup Il'deki sıçanlar, dört hafta boyunca solunum yoluyla tolüen'e (3000 ppm/lsaat/gün) maruz bırakıldı. 30. günün sonunda tüm ratlar dekapite edilerek karaciğer dokuları ışık mikroskobu takibi için %10'luk nötral formalin ile fikse edilip, rutin histolojik takip serilerinden geçirilerek parafin bloklara gömüldü. Ghrelin dağılımını belirlemek amacıyla parafin bloklardan 5 µm kalınlığında kesitler polilizinli lamlara alındı. Avidin-biotin-peroksidaz yöntemi ile ghrelin immünreaktivitesi belirlendi. Karaciğer dokusunda ghrelin immünreaktivitesi Grup I'de şiddetli (+3), Grup Il'de bazı hepatositlerde hafif (+1) olarak izlenirken, bazı hepatositlerde ise immünreaksiyon gözlenmedi. Negatif kontrol için yapılan boyamalarda, hepatositlerde herhangi bir immünreaktivite görülmedi. Pozitif kontrol olarak ise, mide dokusunda ghrelin immünreaktivitesi belirlendi. Bu çalışmanın sonucunda, tolüen maruziyetinin karaciğer dokusunda ghrelin ekspresyonunu azalttığı belirlendi.

Toluene is an aromatic hydrocarbon has addictive and toxic effect that is used widely in the industry. Ghrelin was a recently identified multifunctional hormone that is found in many organs, including the liver. This study aimed to determine ghrelin expression via immunohistochemical methods in rats that were experimentally administered toluene, a toxic agent for liver. For this purpose, 14 adult male Wistar-albino rats were divided into two equal groups. Animals in group I were used as control group. The rats in group II were exposed toluene (3000 ppm/1hour/day) for four-weeks. Rats from both groups were decapitated 30 days after the operation. The liver tissues were removed and fixed in % 10 neutral formalin solution. Then tissue specimens were embedded in paraffin and sectioned (thickness, 5 µm). The sections were immunohistochemically stained using avidin-biotin-peroxidase method for determination ghrelin immunoreactivity. Ghrelin immunoreactivity in the hepatocytes was determined as strong (+3) in the control group and low (+1) or no staining in the toluene inhaled group. No immunoreactivity was observed in negative control specimens. Ghrelin immunoreactivity was detected in sections of rat stomach used as a positive control. The results obtained in our study indicate that toluene inhalation causes a decrease in ghrelin expression in the liver.