The effects of zoledronic acid on neointimal hyperplasia : a rabbit carotid anastomosis model - Original Investigation

Abstract

Objective: The aim of the present study was to investigate the effect of zoledronic acid (ZA), as a matrix metalloproteinase inhibitor, on neointimal hyperplasia in rabbit carotid anastomosis model. Methods: New Zealand male rabbits were divided into two groups as placebo and treatment groups in this experimental study. After anesthesia, the right carotid artery of each rabbit was end-to-end anastomosed with an 8/0 polypropylene suture. Left carotid artery was kept as control without any operation. Placebo group (n=6) received phosphate buffered saline (PBS) (0.5mL/kg/day/s.c.) for 28 days postoperatively, whereas ZA group (n=6) received ZA (100 µg/kg/day/s.c.) for the same period. After sacrification, the anastomosed and control arteries were isolated. Morphometric and immunohistochemical examinations were performed. Statistical analyses of morphometric and immunohistochemical data were performed using two-way ANOVA and Chi-square test respectively. Results: In PBS group, vascular injury in the anastomosed artery significantly increased the intimal area (anastomosed: 112.51±61.18 µm2*1000 vs. control: 22.62±4.26µm2*1000, p<0.01) and intima/media index (anastomosed: 0.347±0.29 vs. control: 0.075±0.01, p<0.05) compared to control artery. ZA significantly reduced the intimal area (39.29±18.21 µm2*1000 , p<0.01) and intima/media index (0.112±0.07, p<0.05) compared to PBS group. Additionally, α-smooth muscle actin immunopositivity was found significantly decreased in anastomosed arteries from ZA group (ZA: 2.33±0.52 vs. PBS: 3.50±0.5, p<0.05). Moreover, intensive gelatinase (MMP-2 and MMP-9) immunoreactivities were clearly seen in anastomosed arteries compared to control arteries from PBS group. ZA apparently decreased immunopositivities for gelatinases in anastomosed arteries. Conclusion: ZA might be a promising agent for prevention of neointimal hyperplasia, which is the most significant cause of graft failures in late postoperative period.

Amaç: Çalışmamızın amacı tavşan karotis arter anastomoz modelinde gelişen neointimal hiperplazi üzerine bir matriks metalloproteinaz inhibitörü olarak zoledronik asidin (ZA) etkilerini araştırmaktır. Yöntemler: Bu deneysel çalışmada Yeni Zelanda tipi erkek tavşanlar plasebo ve ilaç-tedavi olmak üzere iki gruba ayrılmıştır. Anestezi sonrası, her bir tavşanın sağ karotis arteri 8/0 polipropilen sütür ile uç uca anastomoz edilmiştir. Sol karotis arter ise uygulama olmaksızın kontrol olarak bırakılmıştır. Plasebo grubundaki tavşanlara (n=6) operasyon sonrası 28 gün boyunca PBS (0.5mL/kg/gün/s.k.) uygulanırken ilaç grubundaki tavşanlara (n=6) aynı süre boyunca zoledronik asid (100 µg/kg/gün/s.k.) uygulanmıştır. Sakrifikasyondan sonra anastomozlu ve kontrol arterler izole edilmiştir. Morfometrik ve immünohistokimyasal incelemeler gerçekleştirilmiştir. Morfometrik ve immünohistokimyasal verilerin istatistiksel analizleri sırasıyla çift yönlü ANOVA ve Ki-kare testi ile yapılmıştır. Bulgular: PBS grubunda anastomozlu arterlerde oluşan damar hasarının, kontrol artere kıyasla intimal alanı (kontrol: 22.62±4.26, µm2*1000 anastomozlu: 112.51±61.18 µm2*1000, p<0.01) ve intima/media indeksini (kontrol: 0.075±0.01, anastomozlu: 0.347±0.29, p<0.05) istatistiksel olarak anlamlı şekilde artırdığı saptanmıştır. Zoledronik asidin, PBS grubuna kıyasla intimal alanı (39.29±18.21 µm2*1000, p<0.01) ve intima/media indeksini (0.112±0.07, p<0.05) anlamlı şekilde azaltmıştır. Buna ek olarak, ZA grubundan anastomozlu arterlerde ?-düz kas aktin immunpozitivitesi anlamlı şekilde düşük bulunmuştur (PBS: 3.50±0.55, ZA: 2.33±0.52, p<0.05). Ayrıca, PBS grubundan anastomozlu arterlerde kontrol arterlere kıyasla yoğun jelatinaz (MMP-2 ve MMP-9) immunoreaktivitesi açıkça görülmüştür. Zoledronik asit anastomozlu arterlerde jelatinazların immunpozitifliğini belirgin şekilde azaltmıştır. Sonuç: Zoledronik asit, vasküler cerrahide geç dönem greft yetmezliğinin en önemli sebebi olan neointimal hiperplazinin önlenmesi için kullanılabilecek umut verici bir ajan olabilir.